J. Taroni 2018
In response to comments, we wish to provide a bit more background information about the recount2 compendium. To do so, we’ll gather information from the following sources:
wget -N -O data/sample_info/metasra.v1-4.json http://metasra.biostat.wisc.edu/static/metasra_versions/v1.4/metasra.v1-4.json
WARNING: timestamping does nothing in combination with -O. See the manual
for details.
--2018-11-29 15:45:23-- http://metasra.biostat.wisc.edu/static/metasra_versions/v1.4/metasra.v1-4.json
Resolving metasra.biostat.wisc.edu (metasra.biostat.wisc.edu)... 128.104.140.173
Connecting to metasra.biostat.wisc.edu (metasra.biostat.wisc.edu)|128.104.140.173|:80... connected.
HTTP request sent, awaiting response... 200 OK
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58800K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.45M 4s
58850K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.51M 4s
58900K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.44M 4s
58950K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.10M 3s
59000K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.98M 3s
59050K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 2.57M 3s
59100K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.24M 3s
59150K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.84M 3s
59200K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.70M 3s
59250K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.27M 3s
59300K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.24M 3s
59350K .......... .......... .......... .......... .......... 93% 1.26M 3s
59400K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 1.53M 3s
59450K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 2.24M 3s
59500K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 2.03M 3s
59550K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 1.44M 3s
59600K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 1.54M 3s
59650K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 1.38M 3s
59700K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 1.39M 3s
59750K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 716K 3s
59800K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 623K 3s
59850K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 522K 3s
59900K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 859K 3s
59950K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 592K 3s
60000K .......... .......... .......... .......... .......... 94% 813K 3s
60050K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 705K 3s
60100K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 971K 3s
60150K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 806K 3s
60200K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 962K 2s
60250K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 928K 2s
60300K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 1.33M 2s
60350K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 921K 2s
60400K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 2.81M 2s
60450K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 1.49M 2s
60500K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 831K 2s
60550K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 933K 2s
60600K .......... .......... .......... .......... .......... 95% 854K 2s
60650K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 750K 2s
60700K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 903K 2s
60750K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 729K 2s
60800K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 442K 2s
60850K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 632K 2s
60900K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 661K 2s
60950K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 659K 2s
61000K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 843K 2s
61050K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 1.06M 2s
61100K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 874K 2s
61150K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 1.62M 2s
61200K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 3.82M 2s
61250K .......... .......... .......... .......... .......... 96% 4.49M 2s
61300K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 2.97M 2s
61350K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.83M 2s
61400K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.20M 1s
61450K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.52M 1s
61500K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 2.92M 1s
61550K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.29M 1s
61600K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.41M 1s
61650K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.75M 1s
61700K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.07M 1s
61750K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.88M 1s
61800K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 2.54M 1s
61850K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 2.05M 1s
61900K .......... .......... .......... .......... .......... 97% 3.78M 1s
61950K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.30M 1s
62000K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.31M 1s
62050K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 4.22M 1s
62100K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.72M 1s
62150K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 4.95M 1s
62200K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.32M 1s
62250K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.63M 1s
62300K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.90M 1s
62350K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.56M 1s
62400K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.03M 1s
62450K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 3.89M 1s
62500K .......... .......... .......... .......... .......... 98% 4.26M 1s
62550K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 3.84M 1s
62600K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 3.65M 0s
62650K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 2.64M 0s
62700K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 4.10M 0s
62750K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 3.54M 0s
62800K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 3.66M 0s
62850K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 3.45M 0s
62900K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 3.27M 0s
62950K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 2.87M 0s
63000K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 4.06M 0s
63050K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 3.53M 0s
63100K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 2.05M 0s
63150K .......... .......... .......... .......... .......... 99% 3.31M 0s
63200K .......... .......... ....... 100% 1.70M=51s
2018-11-29 15:46:15 (1.20 MB/s) - ‘data/sample_info/metasra.v1-4.json’ saved [64744709/64744709]
# BiocInstaller::biocLite("SRAdb")
# library(SRAdb)
# magrittr pipe
`%>%` <- dplyr::`%>%`
Custom function for converting between the sample (e.g., SRS
) accession codes and the sample names in recount2 which follow this pattern: SRPxxxxxx.SRRxxxxx
ConvertToRecountSampleName <- function(sample.vector, conversion.df) {
# Takes a vector of sample accession codes and converts them to sample/column
# names for use with recount2 expression matrices
#
# Args:
# sample.vector: a vector of sample accession codes
# conversion.df: a data.frame that provides the mappings between study,
# sample, and run accession codes -- must have "run",
# "study", and "sample" column names
#
# Returns:
# sample.names: a vector of sample/column names for use with recount2 --
# these are the study and run accession codes separated with
# a `.`
# error handling
check.colnames <- all(c("run", "study", "sample") %in%
colnames(conversion.df))
if (!check.colnames) {
stop("colnames(conversion.df) must contain 'run', 'study', 'sample'")
}
# magrittr pipe, just in case
`%>%` <- dplyr::`%>%`
# filter to only the samples in the supplied vector and then concatenate their
# study and sample accession codes
sample.names.df <- conversion.df %>%
dplyr::filter(`sample` %in% sample.vector) %>%
dplyr::mutate(recount.name = paste(study, run, sep = "."))
# return a vector of the recount2 names
return(sample.names.df$recount.name)
}
plier.file <- file.path("data", "recount2_PLIER_data",
"recount_data_prep_PLIER.RDS")
plier.data <- readRDS(plier.file)
The experiment accession is in the column name of the expression data matrix, as is the run accession.
experiment.accession <- unique(stringr::word(colnames(plier.data$rpkm.cm), 1,
sep = "[.]"))
head(experiment.accession)
[1] "SRP000599" "SRP001313" "SRP001349" "SRP001462" "SRP001540" "SRP001558"
run.accession <- stringr::word(colnames(plier.data$rpkm.cm), 2, sep = "[.]")
# remove the training data from the workspace, we no longer need it
rm(plier.data)
metasra.file <- file.path("data", "sample_info", "metasra.v1-4.json")
metasra <- jsonlite::read_json(metasra.file)
The MetaSRA project uses sample identifiers (SRS
), whereas recount2 uses study (SRP
) and run (SRR
) identifiers. We’ll need to convert between the two. We’ll use the SRAdb
Bioconductor package to do so.
For notebook purposes, I will comment most of this out, as the file downloaded and unzipped by calling SRAdb::getSRAdbFile()
is ~35GB. I will save (& commit) the most important part: the data.frame that contains the mapping between accessions.
# sql.file <- getSRAdbFile()
# sql.file <- "SRAmetadb.sqlite"
# sra.con <- dbConnect(SQLite(), sql.file)
# given the run accession, return the study and sample accesions
# conversion.df <- sraConvert(run.accession,
# out_type = c("study", "sample"), sra.con)
# conversion.file <- file.path("data/sample_info/recount2_srr_srs_srp.tsv")
# readr::write_tsv(conversion.df, conversion.file)
# md5sum SRAmetadb.sqlite
Because we’ve commented the above out for size concerns, we’ll go ahead and read conversion.df
back in using the TSV file we’ve saved and committed.
conversion.file <- file.path("data", "sample_info", "recount2_srr_srs_srp.tsv")
conversion.df <- readr::read_tsv(conversion.file)
Parsed with column specification:
cols(
run = col_character(),
study = col_character(),
sample = col_character()
)
We’ll also use these metadata to split the recount2 data into different training sets based on the biological conditions or sample types.
# only proceed with samples that are in the recount2 compendium that we used
filtered.metasra <- metasra[which(names(metasra) %in% conversion.df$sample)]
Not all of the runs in the subset of the recount2 compendium we used are present in MetaSRA.
length(filtered.metasra) / length(unique(conversion.df$sample))
[1] 0.9940266
But the majority are.
The MetaSRA project (Bernstein, Doan, and Dewey. Bioinformatics. 2017.) predicted the “sample type” – e.g., cell line vs. tissue. What’s the breakdown in the compendium we used for training (with no regard for confidence)?
sample.type <- lapply(filtered.metasra, function(x) x$`sample type`)
table(unlist(sample.type))
cell line in vitro differentiated cells induced pluripotent stem cell line
11760 1760 545
primary cells stem cells tissue
4663 1120 10272
The bulk of samples are predicted to be cell lines and tissue samples. Let’s get a list of recount2 sample/column names for the cell line samples and the tissue samples.
cell.line.samples <- names(sample.type[which(sample.type == "cell line")])
cell.line.accessions <- ConvertToRecountSampleName(cell.line.samples,
conversion.df)
cell.line.file <- file.path("data", "sample_info",
"recount2_cell_line_accessions.tsv")
write.table(cell.line.accessions, file = cell.line.file, sep = "\t",
row.names = FALSE, col.names = FALSE, quote = FALSE)
tissue.samples <- names(sample.type[which(sample.type == "tissue")])
tissue.accessions <- ConvertToRecountSampleName(tissue.samples,
conversion.df)
tissue.file <- file.path("data", "sample_info",
"recount2_tissue_accessions.tsv")
write.table(tissue.accessions, file = tissue.file, sep = "\t",
row.names = FALSE, col.names = FALSE, quote = FALSE)
We’ll use the mapped ontology terms – specifically, the mapped Experimental Factor Ontology terms – provided in MetaSRA to get an idea of what’s in our training set.
We’ve been asked specifically about autoimmune samples and cancer samples, so let’s start there.
# "autoimmune disease"
# https://www.ebi.ac.uk/ols/ontologies/efo/terms?short_form=EFO_0005140
autoimmune.samples <-
lapply(filtered.metasra,
function(x) any("EFO:0005140" %in% x$`mapped ontology terms`))
sum(unlist(autoimmune.samples))
[1] 99
There are 99 SLE samples (and 18 controls) in the single SLE whole blood data set in recount2 (SRP062966
).
# "cancer"
# https://www.ebi.ac.uk/ols/ontologies/efo/terms?short_form=EFO_0000311
cancer.samples <-
lapply(filtered.metasra,
function(x) any("EFO:0000311" %in% x$`mapped ontology terms`))
sum(unlist(cancer.samples))
[1] 6760
Let’s write these accession codes to file.
# just use the accession code, which is the name of the list for which the
# element == TRUE
cancer.samples <- names(cancer.samples[which(unlist(cancer.samples))])
cancer.accessions <-
ConvertToRecountSampleName(cancer.samples,
conversion.df)
cancer.file <- file.path("data", "sample_info",
"recount2_cancer_accessions.tsv")
write.table(cancer.accessions, file = cancer.file, sep = "\t",
row.names = FALSE, col.names = FALSE, quote = FALSE)
From EFO term:
A process in which the act is intended to modify or alter some other material entity
# "treatment"
# https://www.ebi.ac.uk/ols/ontologies/efo/terms?short_form=EFO_0000727
treatment.samples <-
lapply(filtered.metasra,
function(x) any("EFO:0000727" %in% x$`mapped ontology terms`))
sum(unlist(treatment.samples))
[1] 4506
We’ll want to train models exclusively on blood samples and on everything-but-blood samples. We’re interested in this because the model learns leukocyte associated latent variables.
We’ll use the Uberon term for this UBERON:0000178
blood.samples <-
lapply(filtered.metasra,
function(x) any("UBERON:0000178" %in% x$`mapped ontology terms`))
sum(unlist(blood.samples))
[1] 2973
Convert the blood samples and the everything-but-blood samples to the recount2 sample/column names and write to file.
# just the accession codes
blood.samples <- names(blood.samples[which(unlist(blood.samples))])
blood.accessions <- ConvertToRecountSampleName(blood.samples, conversion.df)
blood.file <- file.path("data", "sample_info",
"recount2_blood_accessions.tsv")
write.table(blood.accessions, file = blood.file, sep = "\t",
row.names = FALSE, col.names = FALSE, quote = FALSE)
not.blood.samples <- setdiff(names(filtered.metasra), blood.samples)
not.blood.accessions <- ConvertToRecountSampleName(not.blood.samples,
conversion.df)
not.blood.file <- file.path("data", "sample_info",
"recount2_other_tissues_accessions.tsv")
write.table(not.blood.accessions, file = not.blood.file, sep = "\t",
row.names = FALSE, col.names = FALSE, quote = FALSE)